伍仲文早年追求进步,冲破封建习俗束缚,到县城唯一的女子高等学校求学。在大革命浪潮影响下,成为爱国学生运动的积极分子。民国13年上半年,到广州进入当时著名妇女运动堡垒之一的“妇女职业学校”半工半读。翌年,参加省港大罢工女工部工作,同年,加入中国共产党。民国15年冬,赴苏联学习,民国17年秋回国,在上海中共法南区负责指导青年运动。民国18年,先后在中共吴淞区委宣传部、闸北区委组织部工作,领导丝厂、纱厂的女工运动,并任共青团闸北区委书记。
民国20年1月17日和18日,蔡博真和伍仲文等一批共产党员分别在上海三马路(今汉口路)东方旅社和天津路中山旅社等处秘密开会,由于叛徒告密,遭租界当局巡捕逮捕。不久,被押送龙华淞沪警备司令部军法处看守所。蔡、伍在敌人的法庭上大义凛然,忠贞不屈。2月7日晚,24名共产党员被集体杀害。据目击者称,伍是最后一个倒下的,身上被打了13枪。

